猪苓为多孔菌科真菌猪苓的干燥菌核， 别名稀苓、 地乌桃、 野猪食、 猪屎苓等 ［1 ］ ， 已有两千多年入药历史， 首载于 《神农本草经》 ， 是名贵真菌类药材， 具有利水渗 湿之功效， 主治小便不利、 水肿、 泄泻、 淋浊、 带下等 症 ［2 ］ ， 主要化学成分是多糖、 甾体、 氨基酸、 蛋白质、 维 生素及微量元素等。近年来猪苓的有效成分、 药理作 用研究取得了一定的进展， 综述如下。
1 猪苓的化学成分
1．1 多糖类 猪苓含有的多糖为水溶性多聚糖， 主链 由 β- (1 → 3) - 糖苷键连接， 侧链由 1 个 β- D- 吡喃葡萄 糖基链接 β- (1 → 6) - 糖苷键组成。此外， 猪苓还含有 多种杂糖(D- 岩藻糖、 D- 木糖、 D- 甘露糖、 D- 葡萄糖、 D- 半乳糖、 L- 阿拉伯糖、 L- 鼠李糖) ［3 ］ 。多糖是猪苓的主 要活性成分， 具有较好的抗肿瘤、 延缓衰老、 增强免疫 和保护肝脏等作用 ［4 ］ 。目前多糖的提取技术已由传统 的溶剂提取法逐渐转向酶解 ［5 ］ 、 超声波 ［6 ］ 、 微波辅助 ［7 ］ 等新技术， 与传统技术相比， 这些方法提取率高、 高效 节能、 易操作、 防降解。
1． 2 甾体类 甾体化合物主要为麦角甾醇、 猪苓酮 A、 猪苓酮 B、 猪苓酮 C 及多孔菌甾酮 A、 B、C、 D、 E、F、 G ［8 ］ 和麦角甾-4， 6， 8(14)， 22- 四烯-3- 酮 ［9 ］ 等 30 余种。 甾体类化合物是猪苓的主要化学成分， 具有利水渗湿 功效。麦角甾醇和麦角甾-4， 6， 8(14)， 22- 四烯-3- 酮是 猪苓的主要利尿成分 ［10 ］ ， 可作为猪苓指标性成分。有 学者采用 HPLC 法提取猪苓麦角甾醇、 麦角甾酮， 认为 此方法灵敏、 快速和准确， 可有效评价猪苓质量 ［11 ］ 。研 究表明， 猪苓中麦角甾醇含量与产地、 规格、 生长时间 等因素有关 ［12-15 ］ 。
1． 3 非甾体类 猪苓中非甾体类化合物(除多糖类 外)主要有 α- 羟基- 二十四酸、 二十八碳酸、 对羟基苯甲 醛、 α- 羟基二十四烷酸乙酯、 5- 羟基甲基糠醛、 N- (2'- 羟 基二十四烷酰)-1， 3， 4- 三羟基-2- 十八鞘氨、 D- 甘露醇、 腺嘌呤核苷、 L- 阿糖醇、 尿嘧啶核苷、 尿嘧啶、 烟酸、 木 栓酮、 1β- 羟基木栓酮、 大黄素甲醚、 大黄酚 ［16 ］ 。
1． 4 氨基酸类 研究发现， 猪苓菌核中含有 17 种氨 基酸(包括人体需要的 7 种必需氨基酸)， 分别为苏氨 酸、 缬氨酸、 亮氨酸、 异亮氨酸、 苯丙氨酸、 甲硫氨酸、 赖 氨酸、 天冬氨酸、 酪氨酸、 谷氨酸、 丝氨酸、 组氨酸、 精氨 酸、 甘氨酸、 丙氨酸、 脯氨酸、 胱氨酸， 其含量大于人们 日常从食物中摄取的氨基酸含量 ［17 ］ 。
1． 5 维生素类 杨革 ［18 ］ 采用离子发射光谱仪测定猪 苓中的化学成分， 发现其含有大量的维生素 B1、 维生素B2、 维生素 B6、 维生素 B12 和维生素 E， 微量维生素 A、 维生素 C， 其中维生素 B1、 维生素 B2 和维生素 E 的含 量高于肉类， 维生素 B12 含量高于奶酪和鱼类。B 族 维生素和维生素 E 是人体自由基的清除剂， 可以预防 或治疗肿瘤及心血管疾病。
1． 6 无机元素类 老骄阳等 ［19 ］ 采用 ICP- MS 法检测 发现， 猪苓菌核中 K、 Mn、 Ca、 Na 含量丰富， Mg、 Al、 Cr、 Zn 次之， Sb、 Ba、 Ni、 Hg、 Tl、 Pb、 U、 As、 Se、 Mo、 Ag、 Cd、 Fe、 Co 含量较少。李利华 ［20 ］ 运用原子吸收光谱法分析 了猪苓中的 Ca、 Mg、 Fe、 Mn、 Zn、 Cu 金属元素含量， 结果 发现， 猪苓中富含人体必需的 Ca、 Mg、 Fe、 Zn 等金属元 素， 其中 Ca ＞ Mg ＞ Fe ＞ Zn ＞ Mn ＞ Cu。
2 猪苓的药理作用
2． 1 利尿作用 Zhang 等 ［21 ］ 研究发现， 猪苓提取液可 显著增加大鼠尿量， 增加大鼠尿 Na + 、 尿 K + 和尿 Cl － 含 量， 调节降低肾脏髓质水通道蛋白(AQP2)表达， 并降 低肾脏髓质抗利尿激素 V2 型受体(V2Ｒ)表达， 具有利 尿活性。 Zhao 等 ［22 ］ 研究发现， 猪苓正己烷、 正丁醇提取物 和分离的化合物(麦角甾 4， 6， 8(14)， 22- 四烯-3- 酮， 麦 角固醇和 e - mannitol)具有利尿活性， 其中麦角甾 4， 6， 8(14)， 22- 四烯-3- 酮是最强的利尿成分。 李森等 ［23 ］ 研究茯苓、 猪苓、 黄芪对 0． 9%NaCl 溶液 负荷大鼠的利尿作用。结果发现， 对比阴性对照组， 猪 苓高、 中剂量组 Cl － 排出量显著升高， 茯苓 K + 排出量显 著升高， 三者均有利尿作用， 且不受体内酸碱平衡变化 影响。 李思明 ［24 ］ 研究了猪苓对机体肾素- 血管紧张素系 统的影响。结果发现， 给药 8 天后， 猪苓给药组与呋塞 米组利尿显著且作用相当;大鼠血浆醛固醇(ALD)血 管紧张素(Ang2)水平显著降低， 抗利尿激素(ADH)、 心钠素(ANP)水平显著增加， 与给药次数相关， 且呈剂 量依赖性， 为阐明猪苓利水渗湿的作用机制提供了 依据。
2． 2 抗肿瘤作用 Zhang 等 ［25 ］ 研究发现， 猪苓多糖协 同卡介苗可抑制大鼠膀胱癌， 并降低卡介苗在体内的 副作用。同时增加了大鼠腹腔巨噬细胞和膀胱上皮细 胞 CD86、 CD40、 TLＲ4/CD14 的表达， 癌组织上皮细胞 CD86 未被癌细胞表达。 江泽波等 ［26 ］ 以巨噬细胞 ＲAW264． 7 为载体， 通过 γ 干扰素(IFN- γ)诱导成炎症 M1 亚型巨噬细胞， 研究 猪苓多糖对 M1 细胞膜表面蛋白表达及其相关细胞因 子的影响， 探讨猪苓多糖对肿瘤的抑制作用机制。结 果显示， 猪苓多糖具有双向调节作用， 可以极化巨噬细 胞为 M1 型， 增加 M1 炎症因子的表达。 曾星等 ［27 ］ 研究发现， 猪苓多糖主要经 TLＲ4 信号 通路抑制相关基因表达、 NF- κBp65DNA 结合活性与胞 核表达， 从而抑制肿瘤生长。 李彩霞等 ［28 ］ 研究发现， 猪苓多糖可通过上调膀胱 癌大鼠外周血的 CD8 + 、 CD3 + 、 CD28 + 及 TCＲγδ + T 淋 巴细胞水平， 增强对抗原的免疫应答水平， 促进机体免 疫功能， 发挥抗肿瘤作用。
2．3 抗炎作用 胡金萍等 ［29 ］ 以 J774 细胞为载体， 采 用不同浓度的猪苓进行干预。结果显示， 猪苓在 0． 05 ～50 μg·ml －1 时抑制 LPS 诱导的 J774 细胞 IL-6、 iNOS 的表达， 并呈浓度依赖性， 起到了抑制炎症的作用。 Sun 等 ［30 ］ 从猪苓菌核中分离出三个新型蜕皮类固 醇， 命名为 polyporoid A、 B 和 C， 并对小鼠 TPA 诱导的 炎症进行了试验。结果显示， 三种化合物具有抗炎活 性， 并能抑制小鼠病痛。
江泽波等 ［31 ］ 利用对脂多糖 LPS 诱导巨噬细胞 J774 炎症模型， 给予不同浓度猪苓多糖干预， 探讨其抗 炎作用及机制。结果显示， 猪苓多糖降低了炎症因子 的升高， 同时降低了丝裂原活化蛋白激酶 (p38)、 p65 丝裂原活化蛋白激酶(p65) 蛋白磷酸化和细胞核因子 EＲK42/44 的表达， 可能通过丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号通路来降低炎症损伤。
2． 4 免疫调节作用 Sun 等 ［32 ］ 以猪苓菌丝体及子实 体提取分离纯化多糖， 进行小鼠免疫和抗微生物活性 实验。结果显示， 猪苓多糖可增加小鼠脾脏淋巴细胞 的杀伤能力， 促进小鼠 B 和 T 细胞的增殖， 同时抑制大 肠杆菌和金黄色葡萄球菌， 具有免疫作用。 Sun 等 ［33 ］ 利用猪苓水溶性多糖(PAP)进行 ICＲ 小 鼠细胞卵蛋白和体液免疫及毒性实验。研究结果表 明， 猪苓多糖可促进小鼠淋巴细胞增殖， 显著增强小鼠 血清中抗体 IgG2b， PAP 在无菌盐水的安全浓度为2． 5、 5、 10 μg·μl －1 ， 猪苓多糖(PAP) 可成为安全的疫苗 辅剂。
潘万龙等 ［34 ］ 研究发现， 猪苓多糖对脐血造血干细 胞有明显扩增作用， CD34 + 细胞扩增倍数为 6． 33， 并能 促进脐血造血干细胞移植小鼠免疫造血重建， 在生存 率、 血象恢复时间和效果上， 猪苓多糖移植药物组优于 单纯移植小鼠组， 且 CD3 + 、 CD4 + 、 CD8 + 、 CD19 + 水平 存在明显差异。
张皖东等 ［35 ］ 采用注射Ⅱ型胶原建立关节炎(CIA) 大鼠模型， 并分离大鼠 PP 结淋巴细胞(PPL)、 肠道上 皮内淋巴细胞(IEL)和固有层淋巴细胞(LPL)， 采用不 同浓度猪苓多糖共培养。结果显示， 猪苓多糖对于大 鼠 PPL 具有不同的免疫调节作用， 可使 PPL 分泌 TNF- α 减少、 IFN- γ 的分泌增加， IEL 和 LPL 分泌 TNF- α 和 IFN- γ 的水平呈不同程度降低。 2． 5 保肝作用 杜金梁等 ［36 ］ 研究发现， 猪苓多糖能够 抑制 CCl 4 造成的肝细胞损伤， 降低肝细胞中谷丙转氨 酶(ALT)、 谷草转氨酶(AST)和丙二醛(MDA)活性， 提 高肝细胞成活率， 同时显著诱导 CYP3A mＲNA 表达， 具有保护建鲤肝细胞的作用。
刘祥兰等 ［ 37 ］ 构建了大鼠酒精性脂肪肝模型， 设置了 小(0．3 g·kg －1 )、 中(1 g·kg －1 )、 大剂量(3 g·kg －1 )猪 苓多糖给药组。结果显示， 各剂量组脂肪肝大鼠血清 中胆固醇(TC)、 三酰甘油(TG)水平下降， 肝脏细胞的 脂肪变性程度减轻， 猪苓多糖具有治疗大鼠酒精性脂 肪肝作用。
秦如松等 ［38 ］ 将 80 例慢性乙型肝炎患者随机分为 治疗组和对照组， 治疗组给予阿德福韦酯胶囊和猪苓 多糖胶囊， 对照组给予阿德福韦酯胶囊， 服用 1 个月后 化验肝功能、 乙型肝炎病毒标志物及乙型肝炎病毒复 制指标。结果显示， 治疗组谷丙转氨酶(ALT)、 总胆红 素(T- BiL)复常率及 HBV- DNA 转阴率高于对照组， 且 治疗组有效率为 90． 0%， 表明阿德福韦酯联合猪苓多 糖治疗慢性乙型肝炎能起到较好的抑制病毒、 促进肝 细胞修复作用。
2． 6 保护肾脏作用 王平等 ［39 ］ 以猪苓不同溶剂提取 物， 对大鼠进行尿草酸钙结石抑制作用研究。结果表 明， 猪苓乙酸乙酯浸膏能减少大鼠体内尿及肾组织内 Ca 2 + 含量， 抑制尿草酸钙结石形成。组织病理学显示， 猪苓乙酸乙酯浸膏对大鼠肾损伤有明显改善作用， 同 时可降低血清尿素氮和肌酐的浓度， 减轻肾小管扩张， 抑制肾小管上皮细胞的肿胀、 变性、 坏死及脱落， 具有 明显的肾功能保护作用。
2．7 抗氧化作用 He 等 ［40 ］ 从猪苓菌核中分离出水溶 性多糖 PUP60S2， 并对其抗氧化活性进行了体外实验。 结果显示， PUP60S2 对二苯基苦酰肼基(DPPH) 自由 基、 羟基自由基和超氧自由基具有清除作用， 其 IC 50 值 为 0． 53、 0． 85 和 0． 74 mg · ml －1 ， 表 明 猪 苓 多 糖 PUP60S2 具有抗氧化活性。 李志洲 ［41 ］ 研究了猪苓多糖的最佳微波提取工艺， 并用 过 硫 酸 铵—N， N， N'， N'- 四 甲 基 乙 二 胺 ( AP- TEMED)体系检测了猪苓多糖和猪苓多糖锌对羟自由 基(·OH)和超氧阴离子(·O － 2 )的清除作用。结果显 示， 猪苓多糖及多糖锌均具有清除作用， 猪苓多糖锌的 清除能力大于猪苓多糖， 且清除能力与加入量呈正 相关。 Sekiya 等 ［42 ］ 研究发现， 猪苓提取物多孔菌甾酮 A 和多孔菌甾酮 B 能抑制偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH) 所致的红细胞氧化损伤， 其抗氧化损伤能力与剂量呈 依赖性， 在抗溶血作用方面， 多孔菌甾酮 A 大于多孔菌 甾酮 B。
2． 8 抑菌作用 王小海等 ［43 ］ 萃取了猪苓发酵液的活 性成分， 并对其理化性质、 抑菌活性等进行了研究。结 果表明， 猪苓发酵液稳定性差， 易失活， 可抑制细菌， 其 中三氯甲烷萃取效果最好， 经溶剂系统法鉴别， 猪苓抑 菌活性物质为非水溶性Ⅱ型抗生素。猪苓抑菌活性成 分提高了猪苓的应用价值。 冯航 ［44 ］ 采用乙醇提取猪苓样品， 并对不同浓度提 取液进行抑菌实验。结果表明， 提取液对枯草芽孢杆 菌、 大肠杆菌、 金黄色葡萄菌具有抑制作用， 且与浓度 呈正相关， 其中抑菌效果为枯草芽孢杆菌 ＞ 金黄色葡 萄菌 ＞ 大肠杆菌。
2．9 抗突变作用 王虹等 ［45 ］ 采用中、 高、 低剂量猪苓 多糖， 对环磷酰胺诱导的小鼠进行抗突变作用研究。 结果表明， 猪苓多糖能降低由环磷酰胺诱发小鼠较高 的骨髓细胞微核率和精子畸形率， 各剂量组猪苓多糖 对小鼠微核率抑制率为 31． 77% ～ 84． 28%， 其中低剂 量组猪苓多糖抑制作用最强， 为 84． 28%;各剂量组猪 苓多 糖 对 小 鼠 精 子 畸 形 率 抑 制 率 为 13． 62% ～ 60． 40%， 且与多糖浓度呈正相关。
2．10 抗辐射作用 胡名柏等 ［46 ］ 对大白鼠腹腔进行猪 苓多糖注射， 然后一次全身照射 5 Gy 60 Co γ 射线。结 果显示， 猪苓多糖对大白鼠造血功能和免疫功能具有 一定的防护作用， 注射猪苓多糖实验组大鼠外周血细 胞数、 骨髓有核细胞数明显升高， 脾 NK 细胞活性和脾 指数明显高于辐射对照组， 证明猪苓多糖有抗辐射 作用。
2．11 促进头发生长作用 Inaoka 等 ［47 ］ 研究发现， 猪 苓提取物中的活性成分可促进小鼠毛发生长， 分离出 的 3， 4- 二羟基苯甲醛效果最为显著。Ishida 等 ［48 ］ 研究 了猪苓 50% 乙醇提取物对头发生长的影响。结果显 示， 促 进 头 发 生 长 的 主 要 成 分 为 乙 酰 丁 香 酮、 polyporusterone A 和 polyporusteroneB。
3 小结
猪苓是一种应用广泛的真菌类药材， 化学成分多 样， 包括多糖类、 甾体类、 非甾体类、 氨基酸类、 维生素 类、 无机元素类， 具有利尿、 抗肿瘤、 抗炎、 抗氧化、 免疫 调节、 保肝、 抑菌、 抗突变、 抗辐射等药理作用。目前， 人们对其化学成分和药理作用的研究取得很大进展， 但仍需探讨一些问题。在化学成分方面， 应结合已有 成果， 加强新化合物的探索研究， 丰富完善猪苓的化学 成分。在药理作用方面， 集中在利尿、 抗肿瘤和免疫调 节机制的了解， 其他药理作用如抗菌、 抗氧化等需要进 一步深入研究。另外， 传统医学上猪苓常与其他药材 配伍， 用于利水渗湿， 如猪苓汤、 猪苓散、 茵陈五苓散等 汤剂， 需加大对药物的配伍及药效的研究， 为猪苓临床 开发应用提供科学依据。
猪苓生物活性多样， 毒副作用小， 拥有广阔的开发 前景， 应加强今后的研究工作， 将其更好地应用于临床 以及新药和保健品开发中。
参考文献:
［1］ 吴用琼． 民族药猪苓的传统用法与现代药理研究［J］ ． 中国民族医 药杂志， 2013， 19(9):40-41．
［2］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典(一部)［S］ ． 北京:中国医 药科技出版社， 2015:318-319．
［3］ 金征宇， 顾正彪， 童群义， 等． 碳水化合物化学—原理与应用［M］ ．
作者：王天媛 张飞飞 任跃英 冷世和 冷冰冰 舒志明