首页\中医书籍\西医备考\《细胞和分子免疫学》\
 《细胞和分子免疫学》 > 第二章 粘附分子

第二节 粘附分子的表达的调节

如前所述,细胞粘附分子不仅具有多种生理功能,在一定条件下也与病理过程的发生密切相关。在细胞因子、炎症介质以及其它因素的作用下,细胞表面粘附分子表达的水平和构型可以发生改变,导致细胞粘附能力的变化。体内某些粘附分子的表达是组成性(constitutive)的,即通常状态下细胞表面就有一定水平的表达,如CD11/CD18、ICAM-1、ICAM-2和L-selectin等粘附分子在相应细胞的静止状态下有一定水平的表达,在某些因素的作用下,这些粘附分子的表达也可发生上调或下调(up-regulation ordown-regulation)。另外一些粘附分子的表达可以是非组成性(non-consititutive)的,即通常状态下这些粘附分子在细胞表面表达很少或不表达,但在某些因素的作用下可诱导表达,如E-selectin、VCAM-1在内皮细胞的表达即属此类。对粘附分子表达的调节有构型调节和表达数量调节两种方式,目前关于粘附分子表达调节的资料大多来自于对白细胞与内皮细胞粘附作用的研究。

 

一、粘附分子构型改变影响细胞的粘附作用

除了通过增加或降低粘附分子表达水平来调节细胞粘附能力外,某些因素还可以通过改变粘附分子的构型影响其与配体结合的亲和力,从而调节细胞的粘附能力,这使得对细胞粘附作用的调节更为精细和复杂。

(一)LFA-1分子构型改变对其粘附作用的影响

淋巴细胞在受到外来抗原,PMA,抗CD2、CD3、CD44、CD43或抗MACⅡ类分子单克隆抗体的刺激作用活化后,可发生相互凝集,这种凝集作用依赖于LFA-1/ICAM-1的相互作用,而这两种粘附分子在活化淋巴细胞的表达水平并没有显着增加。静止淋巴细胞即表达一定水平的LFA-1和ICAM-1,NK细胞和某些CTL细胞系更是表达较高水平的LFA-1/ICAM-1分子,但它们并不发生凝集作用。上述事实提示在淋巴细胞活化后,粘附分子可能通过构型变化的方式,提高LFA-1/ICAM相互作用的亲和力,从而提高活化淋巴细胞的粘附能力。

1.NKI-L16和活化状态的LFA-1分子 NKI-L16是一种抗LFA-1的单克隆抗体,其识别的表位在静止淋巴细胞暴露的水平很低。当NKI-L16McAb与淋巴细胞表面的LFA-1作用后,不仅不阻断LFA-1介导的粘附作用,反而可以诱导静止淋巴细胞的相互粘附而使细胞发生凝集。这种诱导粘附作用的机理部分是由NKI-L16McAb改变了LFA-1分子的构型,诱导了NKI-L16识别的表位在静止淋巴细胞的表达。NKI-L16识别表位的表达是粘附作用发生的重要条件,但并不是唯一的,因为CTL细胞虽表达高水平的NKI-L16表位却并不发生自发凝集。目前研究认为,LFA-1分子至少以三种形式存在:(1)静止淋巴细胞表达的LFA-1分子,暴露很少的NKI-L16表位,与ICAM-1分子结合的亲和力(affinity)低;(2)中间状态的LFA-1分子,暴露出大量的NKI-L16表位,但与ICAM-1结合的亲和力仍较低;(3)活化状态的LFA-1分子,暴露出大量高亲和力的NKI-L16表位。不同状态的LFA-1分子在淋巴细胞表面的分布方式是不同的,静止淋巴细胞的LFA-1分子分布分散,而活化的外周血淋巴细胞、CTL克隆、效应T淋巴细胞以及活化的CTL克隆细胞的LFA-1分子呈集中分布,在局部形成高密度的LFA-1分子区域,这可能与NKI-L16表位的暴露有关(图2-10,表2-5)。LFA-1分子在局部形成高密度状态可以提高其与配体结合时的亲合力(avidity)。

在integrin家族中,这种精细的构型调节作用并不仅限于LFA-1分子,已发现VLA-4分子同样存在着静止、部分活化和活化三种要构型,活化的VLA-4分子可与VCAM-1和纤粘连蛋白相结合,部分活化的VLA-4分子仅结合VCAM-1分子,而静止状态的VLA-4分子则失去结合任何配体的能力。

淋巴细胞活化后LFA-1分子分布状态的改变

图2-10 淋巴细胞活化后LFA-1分子分布状态的改变

注:静止外周血淋巴细胞(PBL)向活化PBL分化过程中需要Ca2+存在;活化PBL向效应PBL分化以及CTL克隆向活化的CTL克隆分化过程中需要有Cg2+存在。活化的和效应的PBL或CTL表面LFA分子呈集中分布。

表2-5 三种状态LFA-1分子特性的比较

 静止状态
LFA-1分子
中间状态
LFA-1分子
活化状态
LFA-1分子
LFA-1分布方式分散集中集中
与ICAM-1结合的亲和力
与ICAM-1结合的亲和力
NKI-L16表位暴露
LFA-1β链(CD18)磷酸化

2.Ca2+、Mg2+与LFA-1分子活化状态的关系Ca2+和Mg2+的存在对LFA-1分子与配体的结合是必需的,在粘附试验系统中加入金属离子螯合剂(EDTA或EGTA)去除反应系统中的Ca2+和Mg2+可以完全抑制LFA-1与其配体的结合。采用单克隆抗体对LFA-1分子表位的表达进行检测,发现Ca2+与Mg2+与LFA-1分子某些表位的表达有关,而这些表位的表达是LFA-1分子活化构型的标志。如上述NKI-L16识别表位的表达需要有Ca2+存在;另外一株单克隆抗体24(McAb24)识别的表位在LFA-1、Mac-1和gp150、90均有表达,但依赖Mg2+的存在。PMA或抗细胞表面分子的单克隆抗体作用引起的细胞凝集有一过性持续性两种,一过性的作用在半小时之内消失,而持续性的作用可维持2小时以上。这种现象与离子依赖种类有一定的关系,PMA、NKI-L16、抗CD2和CD44单克隆抗体可以引起持续性的LFA-1分子的活化,它们的作用只依赖Mg2+的存在;而抗CD3、CD43和MHC-Ⅱ类分子的单克隆抗体所引起的凝集是一过性的,它们的作用则依赖Ca2+与Mg2+的同时存在。

LFA-1介导细胞粘附调节的模式图

图2-11 LFA-1介导细胞粘附调节的模式图

注:抗原与TCR/CD3复合物结合后激活磷脂酶c,催化PIP2水解为IP3和DAG,引起LFA-1分子β链的磷酸化,使LFA-1分子构型发生变化,提高与配体结合的亲和力。CD3分子的磷酸化引起TCR/CD3复合物的调变,导致PKC水平下降,使LFA-1分子β链去磷酸化转变为非活化状态而产生去粘附作用。

3.LFA-1分子构型改变的机理 目前对于淋巴细胞活化后导致LFA-1分子构型改变的机制还不十分明了。实验表明,PMA作用于淋巴细胞后,通过激活蛋白激酶C(PKC)使LFA-1分子β链发生磷酸化,很可能与LFA-1分子构型的改变有关。抗CD2或CD3单克隆抗体可以通过影响磷酸肌磷酸肌醇代谢途径导致PKC的激活,但两种McAb影响淋巴细胞粘附分子活化的过程是不同的,抗CD2单克隆抗体诱导持久的LFA-1分子活化,而抗CD3单克隆抗体只能诱导短暂的、一过性的LFA-1分子的活化(图2-11)。这种对粘附分子表达的负反馈调节机制,对于体细胞粘附作用的调节过程可能有重要的意义。体内对粘附作用的负调节意味着细胞可以与相互作用的靶细胞脱离,再作用于其它靶细胞,从而最大限度地发挥作用。前面曾提到McAb24识别的表位表达在活化状态的LFA-1分子,McAb24并不阻断LFA-1分子和Mac-1分子与配体的结合,但却可以明显抑制单核细胞向T细胞的抗原提呈作用、LAK细胞对靶细胞的杀伤作用以及中性粒细胞的趋化移动,这些过程均依赖LFA-1和Mac-1分子与其配体的相互作用。单独CD3单克隆抗体只引起一过性的LFA-1分子的活化,而同时加入McAb24则造成持续性LFA-1分子的活化,提示McAb24可能阻止LFA-1分子由活化状态转变为非活化状态。

(二)其它粘附分子构型的改变对粘附作用的影响

除LFA-1分子外,在integrin家族中其它一些粘附分子构型的改变也可以影响细胞的粘附能力。PMA、抗CD2或CD3单抗可以诱导或增强淋巴细胞的VLA-4(CD49d/CD29)、VLA-5(CD49e/CD29)和VLA-6(CD49f/CD29)与其配体(层粘连蛋白或纤粘连蛋白)的粘附作用,提示上述粘附分子可能通过与LFA-1相类似的机制发生构型变化,导致与配体结合的亲和力升高。Mac-1分子(CD11b/CD18)及血小板糖蛋白GPⅡbⅢa(CD41/CD61)分子在细胞活化后可以暴露新的表位,是其分子构型发生改变的直接证据,但其发生机制目前还不清楚。

尽管目前尚未获得selectin家族粘附分子构型变化影响粘附能力的直接证据,但某些抗L-seletin或抗E-selectin分子EGF结构域的单抗非但不阻断L-selectin分子或E-selecti分子与相应配体的结合,反而具有促进作用,提示selectin家族粘附分子中同样存在着分子构型变化对粘附能力调节的可能性。

 

二、细胞粘附分子表达数量改变对粘附作用的调节

粘附分子表达数量的改变是粘附作用调节的另一个重要方面。粘附分子构型改变与表达数量的增减并不是截然分开的两个过程,两者可能同时存在,共同完成对粘附作用的调节。如淋巴细胞活化后不仅粘附分子构型改变导致亲和力增加,同时也伴有粘附分子数量的增加。

1.调节细胞表面粘附分子表达数量的方式 细胞表面粘附分子表达数量的调节方式主要有诱导贮存在细胞内的粘附分子转移到细胞表面和诱导粘附分子的重新合成两种方式。转移形式的过程发生迅速,只需数秒钟,但维持时间短暂。如凝血酶和组胺作用于内皮细胞可以诱导内皮细胞内贮存在CD62分子迅速转移到细胞表面,然后又很快被内吞而消失;又如CD11b/CD18、CD11c/CD18贮存在中性粒细胞的胞浆颗粒内,在PMA、TNF、IL-1刺激后迅速转移到细胞表面。重新合成过程发生较为迟缓,一般需数小时,但维持时间较长。IL-1、TNF-α作用于血管内皮细胞则可以诱导E-selectin、VCAM-1分子的重新合成与表达,诱导后4小时达到高峰,并可维持24小时以上。

2.细胞因子、炎症介质对粘附分子表达的调节 细胞因子IL-1、IL-3、IL-4、IL-8、PAF、GM-CSF、TNF-α、TNF-β和IFN-γ以及炎症介质白三烯、组胺和凝血酶等可作用于白细胞或/和血管内皮细胞,调节白细胞与血管内皮细胞的粘附作用(表2-6)。在体内可能有多种调节因素同时存在,相互影响,并可能有更多的目前未知的因素参与细胞间粘附的调节过程。

3.细胞的生长、发育状态对粘附分子表达的影响 除了上述细胞因子、炎症介质可以调节细胞粘附分子的表达外,细胞本身的生长、发育、分化及代谢状态也可以影响粘附分子的表达。在胚胎发育过程中,组织细胞粘附分子的表达接一定的规律发生改变,使得不同细胞得以按一定的规律组合在一起,形成不同的组织或器官。肿瘤细胞与其起源的正常组织细胞相比其表达的粘附分子可有很大差异,这可能是某些肿瘤细胞易发生浸润、转移等现象的分子基础。此外,处于不同分化和发育状态的淋巴细胞表达粘附分子也有明显改变,如与未经抗原刺激的T细胞(naive T cell)相比,记忆性T细胞(memory T cell)表达更多的CD2、LFA-1、CD44、VLA-4等粘附分子,而L-selectin在naive T细胞表达水平要明显高于记忆T细胞。

表2-6 细胞因子、炎症介质对细胞粘附分子表达的调节作用

炎症介质或细胞因子靶细胞粘附分子表达水平的变化
IL-1血管内皮细胞E-selectin↑、VCAM-1↑、ICAM-1↑
 某些肿瘤细胞ICAM-1↑
 中性粒细胞CD11b/CD18↑、CD11c、CD18↑
TNF-α、TMF-β血管内皮细胞E-selectin↑、VCAM-1↑、ICAM-1↑
 中性粒细胞CD11b/CD18↑、CD11c/CD18↑
IL-3嗜碱性粒细胞CD11b/CD18↑
IL-4血管内皮细胞VCAM-1↑
IFN-γ血管内皮细胞ICAM-1↑、VCAM-1↑MHC-Ⅱ类分子↑
PAF、IL-8、 GM-CSF中性粒细胞L-selectin↓、CD11b/CD18↑
组胺、凝血酶血管内皮细胞CD62↑
白三烯中性粒细胞粘附作用↑

注:↑表示上调(up-regulation)
↓表示下调(down-regulation)

 

缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾惧綊鏌i幋锝呅撻柛濠傛健閺屻劑寮村Δ鈧禍鎯ь渻閵堝骸浜滅紒缁橆殜婵$敻骞囬弶璺唺闂佽鍎抽崢鏍偨婵犳碍鈷掑〒姘e亾婵炰匠鍥佸洭顢曢敃鈧悿鐐箾閹存瑥鐏柛銈咁儑閹叉悂鎮ч崼婵堢懖闂佺粯鎸婚悷褏妲愰幘瀛樺闂傚牊绋撴禒濂告⒑閸濆嫷鍎戦柛鐘崇墵瀵鈽夊▎鎰妳闂佽法鍠撴慨鏉戭嚕娴煎瓨鈷戦柛婵嗗閻忛亶鏌涢悩铏暗婵″弶鍔欓獮鎺懳旈埀顒勶綖閸涘瓨鐓熸俊顖濇閿涘秴霉濠婂嫬濮嶆慨濠勭帛閹峰懘宕ㄩ棃娑氱Ш妞ゃ垺鐗犲畷鍗炩槈濡⒈鍞堕梻浣哥秺濡法娆㈤妶鍥╃闁哄秲鍔庣弧鈧梻鍌氱墛娓氭宕曢幇鐗堢厵妞ゆ牗绮屾禒锕傛煏閸パ冾伃妤犵偛娲崺鈩冩媴閹绘帊澹曞┑掳鍊愰崑鎾绘煃缂佹ɑ顥堥柡浣规崌閺佹捇鏁撻敓锟�

婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戝鈧倿鎸婃竟鈺嬬秮瀹曘劑寮堕幋鐙呯幢闂備浇顫夊畷妯衡枖濞戞碍顐介柕鍫濇啒閺冨牊鏅查柛娑卞幗濞堟煡姊虹粙娆惧剰妞ゆ垵顦靛濠氭晲閸涘倻鍠庨埢搴ㄥ箚瑜庨鍕煛婢跺棙娅嗙紒璇茬墕椤繘鎼圭憴鍕/闂侀潧枪閸庢煡鎮甸姀銈嗏拺闁荤喐婢樺▓鈺呮煙閸戙倖瀚�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸ゅ嫰鏌ら崫銉︽毄濞寸姵纰嶆穱濠囨倷椤忓嫧鍋撻弽顓炲瀭闁汇垻枪缁犵娀鏌熼悧鍫熺凡缂佺姵鐓¢弻鏇$疀鐎n亖鍋撻弴鐘典笉闁挎繂顦伴悡銉╂煛閸ヮ煈娈斿ù婊堢畺濮婃椽鎸婃径濠冩闂佸摜濮甸悧鐘差嚕婵犳艾惟闁冲搫鍊告禍鐐烘⒑缁嬫寧婀扮紒瀣灴椤㈡棃鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸ゅ嫰鏌ら崫銉︽毄濞寸姵姘ㄧ槐鎾诲磼濞嗘帒鍘$紓渚囧櫘閸ㄥ爼濡撮崘顔煎窛閻庢稒锚娴犲ジ姊虹紒妯虹伇濠殿喓鍊濆畷鎴﹀Ω瑜忕壕濂告倵閿濆骸浜滄い鏇熺矒閺岋絾鎯旈鐓庘拫濠殿喖锕ㄥ▍锝夊箲閸曨垰惟闁靛濡囪ぐ姘舵⒒娴g儤鍤€闁搞倖鐗犻獮蹇涙晸閿燂拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋為悧鐘汇€侀弴銏℃櫇闁逞屽墰婢规洟鎮烽幍铏杸闂佺粯锚閻ゅ洦绔熷Ο鑲╃<闁绘﹢娼ч埢鍫ユ煛瀹€鈧崰鏍嵁閸℃凹妲鹃梺鍦櫕婵數鎹㈠☉銏犲窛妞ゆ牗鍩冮弸鍛存⒑閸濆嫯顫﹂柛鏃€鍨块獮鍐Χ婢跺﹦锛滃┑鐐村灦閿曗晜瀵奸敓锟�婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柟闂寸绾惧鏌i幇顒佹儓闁搞劌鍊块幃瑙勬姜閹殿喚协濠电偞鍨崹鍦不閿濆鐓熼柟閭﹀幖椤ュ绱掗悩鍐插摵婵﹥妞介獮鏍倷閹绘帒肖闂備礁鎲¢幐璇茬暆缁嬭法鏆﹂柡鍥ュ灩缁犺崵绱撴担璐細闁告瑥妫濆铏圭磼濡崵顦ラ梺绋匡工濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柟闂寸绾惧鏌i幇顒佹儓闁搞劌鍊块弻娑㈩敃閿濆棛顦ョ紓浣哄Т缂嶅﹪寮诲澶婁紶闁告洦鍓欏▍锝夋⒑濞茶骞楁い銊ワ躬瀵顓奸崼顐n€囬梻浣告啞閹稿鎯勯鐐叉槬闁逞屽墯閵囧嫰骞掗幋婵囩亾濠电偛鍚嬮崝娆撳蓟閻斿搫鏋堥柛妤冨仒閸犲﹤螖閻橀潧浠滅紒缁橈耿瀵偊骞樼紒妯绘闂佽法鍣﹂幏锟�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾剧懓顪冪€n亝鎹i柣顓炴閵嗘帒顫濋敐鍛闂佽姤蓱缁诲牓寮婚悢椋庢殝闁绘鐗婇幏閬嶆⒑閻熸澘鏆遍柣顓炲€搁~蹇曠磼濡顎撻梺鍛婄☉閿曘儵宕曢幘缁樷拺婵炶尪顕ч獮鏍ㄣ亜閿旂偓鏆柣娑卞枦缁犳稑鈽夊▎鎰仧闂備浇娉曢崳锕傚箯閿燂拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾圭€瑰嫭鍣磋ぐ鎺戠倞妞ゆ巻鍋撶痪鎯ь煼閺岀喖骞嶉纰辨毉闂佺ǹ顑冮崐婵嬪蓟閿熺姴绀冮柕濞у喚鏆梻浣规偠閸斿矂宕愰崸妤€钃熼柍鈺佸暙缁剁偤鎮楅敐鍛暢缂佸苯娼¢幃宄扳堪閸涱収鏆柣銏╁灡椤ㄥ﹤顕i弻銉ョ濞达絽婀遍崣鍡涙⒑缂佹ɑ绀€闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸婂潡鏌ㄩ弴鐐测偓褰掑磿閹寸姵鍠愰柣妤€鐗嗙粭鎺旂棯閹呯Ш闁哄备鈧剚鍚嬮幖绮光偓宕囶唹闂備線鈧偛鑻晶顕€鏌涢悢鍛婄稇闁伙絿鍏樺畷锟犳倷閳哄倻鈧姊鸿ぐ鎺戜喊闁告挻鐟╅悰顕€骞嬮敂瑙f嫽婵炶揪缍€婵倗娑甸崼鏇熺厱闁挎繂绻掗悾鍨殽閻愯尙绠婚柡浣规崌閺佹捇鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾圭€瑰嫭鍣磋ぐ鎺戠倞妞ゆ巻鍋撶痪鎯ь煼閺岀喖骞嶉纰辨毉闂佺ǹ顑冮崐婵嬪蓟閿熺姴绀冮柕濞у喚鏆梻浣规偠閸斿矂宕愰崹顕呮綎婵炲樊浜堕弫鍡涙煃瑜滈崜娑氬垝閺冨牆绠绘い鏃囨閻濇棃姊虹紒妯荤叆闁告艾顑夐幃锟犲Ψ閳哄倻鍘介梺鍝勬川閸嬫盯鍩€椤掆偓濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋為悧鐘汇€侀弴銏℃櫇闁逞屽墰婢规洝銇愰幒鎾跺幈濠电娀娼х€氼剟宕濋妶鍥╃<闁逞屽墯缁绘繈宕掑Δ浣规澑闂備胶绮摫鐟滄澘鍟撮崺鈧い鎺戝€归弳顒傗偓娈垮枟閹倸顕f禒瀣垫晣闁绘柨鎼鎶芥⒒娴h櫣甯涙繛鍙夌墵瀹曟劙宕烽娑樹壕婵ḿ鍋撶€氾拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹瀹勬噴褰掑炊瑜忛弳锕傛煟閵忊懚鍦玻濡ゅ懏鐓欓柟娈垮枛椤eジ鏌涚€e墎绡€闁哄本娲樺鍕醇濠靛棗顥欐繝鐢靛仦閸ㄦ儼褰滈梺琛″亾濞寸姴顑嗛崐鐢告煥濠靛棗鏆欏┑锛勫厴閺屾稓鈧綆鍋呭畷宀€鈧娲樼敮锟犲箖濞嗘垟鍋撳☉娅虫垿顢旈悢鍏尖拻濞达綀濮ょ涵鍫曟煕閿濆繒鐣垫鐐茬箻閺佹捇鏁撻敓锟�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾剧懓顪冪€n亝鎹i柣顓炴閵嗘帒顫濋敐鍛闂備浇顕栭崹浼此囬悽绋跨疇闁哄稁鍘奸悡娑㈡煕鐏炴崘澹樼紒銊e劜缁绘繈鎮介棃娑掓瀰濠电偘鍖犻崶銊ヤ罕闂婎偄娲﹀ú婊堟儗閸℃せ鏀介柣妯哄级婢跺嫰鏌i幘鍗炲姦闁哄矉缍佸鎾倷濞村浜鹃柛锔诲幐閸嬫挸顫濋悙顒€顏�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋涢ˇ鐢稿极閹剧粯鍋愰柤纰卞墻濡茬兘姊绘担鍛婃儓婵炲眰鍨藉畷褰掑捶椤撶姳绗夐梺缁樶缚缁垶鎮″▎鎾寸厸濠㈣泛锕︽禒銏㈢磼閵娿劌鍚圭紒杈ㄦ尭椤撳ジ宕卞▎蹇婃嫲闂備礁鎼悮顐﹀礉閹达箑绠栭柕鍫濐槸绾惧吋绻涢幋鐑囦緵濞寸》鎷�婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柛娑橈攻閸欏繐霉閸忓吋缍戦柛銊ュ€搁埞鎴﹀磼濠ф挸缍婂浼村Ψ閳哄倻鍘搁悗骞垮劚妤犳悂鐛Δ鍛厱閻庯綆浜堕崕鎰磼缂佹ḿ绠栫紒缁樼箞瀹曟帒饪伴崘锝嗗缂傚倸鍊搁崐鍝ョ矓閻㈠憡鍋嬮柣妯款嚙閽冪喖鏌曟繛鐐珕闁稿妫濋弻娑氫沪閸撗€妲堝銈呴獜閹凤拷婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柛娑橈攻閸欏繘鏌i幋婵愭綗闁逞屽墮閸婂湱绮嬮幒鏂哄亾閿濆簼绨介柛鏃撶畱椤啴濡堕崱妤冪懆闂佸摜鍣ラ崹鍫曞箖閻㈠壊鏁傞柛鈥崇箰娴滈箖鏌i悢鍝勵暭闁哥喓鍋熺槐鎺旀嫚閹绘帗娈绘繝纰夌磿閺佽鐣烽悢纰辨晬闁挎繂妫欏▍鍥ㄤ繆閻愵亜鈧牜鏁繝鍕焼濞撴埃鍋撴い銏℃閺佹捇鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸婂潡鏌ㄩ弴鐐测偓褰掑磿閹寸姵鍠愰柣妤€鐗嗙粭鎺楁煕閵娿儱鈧悂婀侀梺缁樓圭亸娆撳箠娴e壊鐔嗛柤鎼佹涧婵洨绱掗悩渚殭闂囧鏌涜箛姘汗闁瑰啿鎳愮槐鎺斺偓锝庝簽缁犵粯鎱ㄦ繝鍛仩闁圭懓瀚版俊鎼佸Ψ閿旀儳缍掗梻鍌欒兌閹虫捇宕甸弽顓炵闁跨噦鎷�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋涢ˇ鐢稿极閹剧粯鍋愰柛鎰紦閻㈠姊洪崫鍕垫Ц闁绘鍟村鎻掆攽閸垻鐒兼繝鐢靛Т濞诧箓鎮¢崘顏呭枑婵犲﹤鐗嗙粈鍫ユ煟閺冨倸甯堕柦鍐枑缁绘盯骞嬮悜鍥︾返濠电偟顑曢崝鎴﹀蓟濞戙埄鏁冮柕鍫濇噺閻庤顪冮妶鍛寸崪闁瑰嚖鎷�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋為〃鍛淬偑娴兼潙绀嬫い鎺嗗亾鐎殿喖娼″娲捶椤撯剝顎楅梺鍝ュ枔閸犳牕鐣烽崼鏇ㄦ晢濞达絽鎼慨鎼佹煟鎼达紕鐣柛搴や含閹广垽骞掗弮鍌滅厯闂婎偄娲︾粙鎺楀煕閹达附鍋i柟顓熷笒婵″吋绻涢崨顔煎闁哄瞼鍠栧畷娆撳Χ閸℃浼� 婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻㈠壊鏁婇柡宥庡幖缁愭淇婇妶鍌氫壕闂佷紮绲块崗妯虹暦缁嬭鏃堝焵椤掑嫮宓侀柕蹇娾偓鑼畾闂侀潧鐗嗛崐鍛婄妤e啯鈷戦悹鍥b偓宕囦化闂佺ǹ顑冮崐鏇綖韫囨稒鎯為柛锔诲幘閻撴捇鏌熼悡搴f憼闁瑰憡鎮傞獮鍐吋婢跺鎷洪梺鑽ゅ枑濠㈡ê鈻撻埡鍛厵闁告垯鍊栫€氾拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸婂潡鏌ㄩ弴妤€浜惧銈庝簻閸熸挳鐛幇顓熷劅闁挎繂瀛╅柨銈夋⒒娴g懓顕滅紒璇插€胯棟妞ゆ牗绮岄ˉ姘攽閻樺磭顣查柣鎾寸懇閺屸剝寰勬繝鍕檸缂備降鍔忓畷鐢垫閹炬剚鍚嬮柛鈩冪懃閳峰矂姊洪崫鍕潶闁告梹鍨块獮鍐Χ婢跺﹦锛滃┑鐐村灦閿曗晜瀵奸敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕閻庤娲忛崕鎶藉焵椤掑﹦绉靛ù婊冪埣閹垽宕卞Ο鍦畾濡炪倖鐗楃划宀€鏁懜鐐逛簻闁靛濡囬。鏌ユ煏閸パ冾伃妤犵偞鐟╁畷姗€鍩¢崘顏嗗锤缂傚倸鍊搁崐鍝ョ矓閻㈠憡鍋嬮柣妯款嚙閽冪喖鏌曟繛鐐珕闁稿妫濋弻娑氫沪閸撗€妲堝銈呴獜閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸ゅ嫰鏌ら崫銉︽毄濞寸姵纰嶇换婵嗏枔閸喗鐏嶉梺鎸庢处閸嬪棛鍒掓繝姘闁挎洍鍋撻柣鎾寸箞閺岋繝宕橀妸褍顣洪梺鍛婎殙濞呮洟濡甸崟顖f晝妞ゆ劑鍨洪悘鎾剁磽娴e壊鍎忕紒缁樏~蹇涙惞鐟欏嫬纾梺闈浨归崕鏌ユ偟閵忋倖鈷戦柣鐔告緲濞堚晠鏌熼崙銈嗗闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾圭€瑰嫭鍣磋ぐ鎺戠倞闁靛ě鍛獎闂備礁澹婇崑鎺戭熆閳ь剟鏌i幒鎴敾缂佺粯鐩畷鍗炍熼崫鍕垫綌闂備礁鎲¢悷銉ф崲閹邦垳浜欓梻浣瑰缁诲倿骞婃惔銊ユ辈婵炲棙鍨瑰Λ顖炴煙椤栧棗瀚禒鎾⒑閸濆嫯顫﹂柛鏃€鍨块獮鍐Χ婢跺﹦锛滃┑鐐村灦閿曗晜瀵奸敓锟�濠电姷鏁告慨鐑藉极閸涘﹥鍙忛柣鎴f閺嬩線鏌熼梻瀵割槮缁惧墽绮换娑㈠箣閺冣偓閸ゅ秹鏌涢妷顔煎⒒闁轰礁绉归弻锝夊箛椤撶喓绋囧┑鐐茬墳缁蹭粙鈥旈崘顔嘉ч柛鈩冪懃椤呯磽娓氬洤鏋涙繛鎾棑閸掓帡宕奸妷銉ь槹濡炪倖鐗楃粙鎾诲矗閸℃稒鈷戠紓浣股戠粈鈧梺绋匡工濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸ゅ嫰鏌涢锝嗙闁稿被鍔庨幉绋款吋婢舵ɑ鏅梺鎸庣箓椤︻垳绮堥崼婢濆綊鏁愰崶銊ユ畬闁瑰吋娼欓敃顏勵潖閾忕懓瀵查柡鍥╁仜閳峰绱撴担鍓插剱闁搞劏顫夌粩鐔煎即閵忕娀鏁滃┑掳鍊撻懗鍫曞矗閸℃稒鈷戠紓浣股戠粈鈧梺绋匡工濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸ゅ嫰鏌涢锝嗙闁稿被鍔庨幉绋款吋婢舵ɑ鏅梺鎸庣箓椤︻垳绮堥崼婢濆綊鏁愰崼鐕佷哗闂佺粯鎸婚幑鍥ь潖濞差亜浼犻柛鏇ㄥ幐閺嬪棝姊洪崨濞楀綊宕戦幇顓犵彾闁哄洨鍠撶弧鈧┑顔斤供閸橀箖宕i崱娑欌拺缂備焦蓱缁€鈧梺绋匡工濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹婵犵數濮烽弫鍛婃叏閹绢喗鍎夊鑸靛姇缁狙囧箹鐎涙ɑ灏ù婊呭亾娣囧﹪濡堕崟顓炲闂佸憡鐟ョ换鎰版箒闂佺ǹ绻愰崥瀣礊閹寸姷纾奸柍褜鍓氬鍕箛椤掑偆鍟囬梻浣告贡閳峰牓宕㈡ィ鍐ㄥ偍婵犲﹤鎳愮壕鐣屸偓骞垮劚濡稒鏅堕悽鍛婄厸閻忕偠顕ф慨鍌炴煙椤斿搫鈧繂鐣烽幒鎴旀婵妫旂槐锟�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾惧湱鈧懓瀚伴崑濠傘€掓繝姘厵闁绘垶锕╁▓鏇㈡煕閵堝懎顏柡灞剧洴椤㈡洟鏁愰崱娆樻К缂備胶鍋撻崕鎶解€﹂悜钘夎摕闁挎繂顦Λ姗€鏌熺粙鍨劉闁稿孩鎹囧娲箹閻愭彃顬夌紓浣筋嚙閻楁挸顕f繝姘╅柍鍝勫€告禍鐐烘⒑缁嬫寧婀扮紒瀣灴椤㈡棃鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕濡ょ姷鍋涢ˇ鐢稿极瀹ュ绀嬫い鎾跺Х閸橆垶姊绘担绛嬫綈鐎规洘锕㈤、姘愁樄鐎规洘甯℃俊姝岊槼闁哥姵鍔欓弻锟犲礃閵娧冣叡閻庤鎸风欢姘跺蓟濞戙垹鐒洪柛鎰典簴婵洭姊洪崫鍕櫤闁诡喖鍊垮濠氬Ω閳哄倸浜為梺绋挎湰缁嬫垿顢旈敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸婂潡鏌ㄩ弴妤€浜惧銈庝簻閸熸潙鐣风粙璇炬梹鎷呴梹鎰殫闂傚倷绀佹竟濠囧磻娓氣偓瀹曟洘娼忛埡鍐箵濠德板€撻懗鍓佺不妤e啯鐓欓悗娑欋缚閹冲啴鏌h箛濠冩珖闁汇儺浜獮鍡氼檨闁绘挸銈搁弻锛勪沪鐠囨彃顫囬梺璇″枔閸婃繂鐣烽幒鎴旀婵妫旂槐锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾圭€瑰嫭鍣磋ぐ鎺戠倞闁靛ě鍛獎闂備礁澹婇崑鎺戭熆閳ь剟鏌i幒鎴敾闁靛洤瀚粻娑㈠箻閹颁椒妲愰梻浣告惈椤戝棝鎮ч悩璇茶摕闁跨喓濮撮悙濠囨煃鏉炴媽顔夐柛瀣崌閺佹劖寰勭€n偅鐝冲┑鐘灱濞夋盯顢栭崱妞绘瀺闁靛繈鍊栭埛鎴︽偣閹帒濡兼繛鍛姍閺岀喖宕欓妶鍡楊伓缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾惧綊鏌熼梻瀵割槮缁炬儳婀辩槐鎺斺偓锝庡亾缁扁晜绻涘顔荤盎閸ユ挳姊虹化鏇燁€嗛柡鍛矒椤㈡瑩寮崼鐔叉嫼閻熸粎澧楃敮妤呮晬閻旇櫣纾奸悹浣告贡缁♀偓閻庢鍣崑鍛崲濠靛鐐婇柕濞у啫姹查梻鍌欒兌缁垰煤閺嶎厼纾归柛锔诲幐閸嬫挸顫濋悙顒€顏�婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柟闂寸绾惧潡鏌熺€电ǹ孝缂佽翰鍊濋弻锕€螣娓氼垱锛嗗┑鐐叉▕娴滄繈寮插⿰鍫熺厽闁逛即娼ф晶顕€骞栭弶鎴含婵﹨娅g划娆撳箰鎼淬垺瀚崇紓鍌欑椤戝棝骞戦崶顒€违闁告稑鐡ㄩ崐濠氭煠閹帒鍔ら柛娆忔濮婅櫣绱掑Ο鑽ゎ槬闂佺ǹ锕ゅ﹢閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐宄懊归崶顒夋晪鐟滃秹婀侀梺缁樺灱濡嫮澹曟繝姘叆婵犻潧妫Σ鍝ョ棯閹规劦娼愮紒缁樼洴楠炲鎮欓崘鈺佸摵鐎殿喗鎮傚浠嬪Ω瑜忛鏇㈡⒑閻熸壆鎽犻柣鐔村劦閹偛煤椤忓懐鍘告繛杈剧到婢瑰﹪宕曢弮鍫熺厸閻忕偠顕ф慨鍌炴煙椤斿搫鈧繂鐣烽幒鎴旀婵妫旂槐锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂撮檷閸嬫垿鏌熺紒銏犳灈缁炬儳顭烽弻娑㈠即閵娿儮鍋撶€n€㈡椽顢旈崟骞喚鐔嗛悹铏瑰皑閸旂喖鏌$仦鐣屽ⅵ婵﹨娅i幉鎾礋椤愩垹笑婵犵妲呴崑鍕偓姘煎枤閸掓帡宕奸妷銉╁敹闂侀潧顧€婵″洭宕i崱娑欌拺缂備焦蓱缁€鈧梺绋匡工濠€閬嶅焵椤掍胶鍟查柟鍑ゆ嫹
闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偞鐗犻、鏇氱秴闁搞儺鍓﹂弫鍐煥閺囨浜鹃梺姹囧€楅崑鎾舵崲濠靛洨绡€闁稿本绮岄。娲⒑閽樺鏆熼柛鐘崇墵瀵寮撮悢铏诡啎闂佸壊鐓堥崰鏍ㄧ珶閸曨偀鏀介柣鎰级閳绘洖霉濠婂嫮鐭掔€规洘锕㈤崺鈧い鎺戝閳锋垿姊婚崼鐔衡枔閹兼挳顥撶槐鎺楁嚑鐠鸿桨姹楅梺濂哥細妞村摜鎹㈠┑鍡╂僵妞ゆ挻绋掔€氬ジ姊绘担鍛婂暈闁瑰憡妲掗妵鎰板礃閳哄喚娲稿┑鐘绘涧濞层劎绮绘ィ鍐╃厱婵炲棗娴氬Σ鍝勵熆瑜忛弫鎼佸焵椤掑喚娼愭繛鍙夅缚閹广垽宕奸妷銉︾€梺鐟板⒔缁垶寮查幖浣圭叆闁绘洖鍊圭€氾拷