首页\中医书籍\西医备考\《实用免疫细胞与核酸》\
 《实用免疫细胞与核酸》 > 第十七章 免疫细胞化学在皮肤病学的应用

第二节 黑素细胞及其肿瘤

 

一、正常黑素细胞

人类黑素细胞主要分布于表皮基底层。表皮黑素细胞起源于神经嵴。HE染色的切片中,黑素细胞核小浓染,胞浆透明,约10个基底细胞中可见一个。能确定黑素细胞的方法有透射电镜观察及多巴染色。免疫细胞化学染色目前仅以抗S-100蛋白抗体着染有一定参考意义,根据其位于基底层一般可判断其系黑素细胞,但有时Langerhan氏细胞也可存在于基底层,而且我们在应用中还发现,不少皮内痣未累及表皮的黑素细胞作S-100蛋白染色时,表皮基底层未能显示阳性的黑素细胞。中间丝系列中,黑素细胞波形纤维蛋白阳性。此外,黑素细胞尚可表达黑素小体相关抗原(HMSA)、一些神经苷酯、P97等黑素瘤相关抗原,但极微弱。

 

二、色素痣

色素痣可表达与黑素细胞相同的抗原,且通常较强。1987年Nakanish等曾克隆出一析仅与色素痣而不与正常黑素细胞及黑素瘤细胞反应的单抗TNKH1,由于未见进一步的研究,尚不能认为色素痣中存在一种特异抗原。

 

三、恶性黑素瘤

恶性黑素瘤主要起源于表皮黑素细胞,少数起源于色素痣、真皮等。在黑素细胞及其肿瘤中,表皮黑素细胞最为成熟,除分化抗原外,表达的抗原少,色素痣特别是交界痣处于较低的增殖状态,表达的抗原较多,恶性黑素瘤分化最低,增生活跃,除能表达正常黑素细胞及痣细胞所表达的抗原外,尚能表达一些特殊的黑素瘤相关抗原,或表达强度远高于正常黑素细胞及痣细胞。

近10余年来,已克隆出许多株黑素瘤相关抗原的抗体,但至今尚未发现一种真正的黑素瘤特异抗原,有的单抗虽具有很高的特异性及敏感性,如两伯称2-139-1及6-26-3的单抗,黑素瘤阳性率26/26,呈强阳性或中度阳性,22例色素痣仅1列交界痣可疑阳性,然而近10年的文献跟踪未见进一步的深入研究。

在众多的黑素瘤相关抗原中,以P97、神经节 苷酯、HMB45研究得较深入。诊断应用中应用最多的是HMB45,Gown等以ABC法观察了60例恶性黑素瘤,仅2例阴性,交界部痣细胞阳性6例,皮内痣及30种168例非黑素细胞性肿瘤全部阴性。最近的免疫电镜观察显示,HMB45抗原定位于黑素化不完全的黑素小体或称异常黑素小体上。由于大样本量的电镜观察发现少数先天性痣的皮内痣中可以有异常黑素小体,另一方面少数黑素瘤中不一定存在异常黑素小体,所以应用HMB45时,除需注意交界部的阳性对黑素细胞肿瘤的良恶性鉴别无意义外,皮内损害中的阳性与阴性亦应结合HE切片进行分析。

神经节 苷酯(Ganglioside)是一类带唾液酸的鞘糖酯,按糖基中唾液酸的数目分为单、二、三、四唾液酸神经节 苷酯,分别简称GM、GD、GT和GQ,每种神经节 苷酯还可根据薄板层析迁移率Rf值的大小再分几个亚类,如GD1、GD2、GD3等。神经组织、黑素细胞等含很微量神经节 苷酯,细胞恶变过程中往往伴有神经节 苷酯的改变,其改变程度与肿瘤的恶性程度和转移有关。黑素瘤细胞表达大量GD3、GM3,25%原发和50%转移性黑素瘤还表达GD2。研究表明,恶性黑素瘤与正常黑素细胞所表达的神经节 苷酯的结构是相同的,一些神经节 酯的单抗只与黑素瘤结合,不与正常黑素细胞、神经组织结合,可能是由于含量的差异所致,另外可能与神经节 苷酯在细胞表面的暴露程度有关。GM3已被称为黑素瘤的跨种抗原,但GD3较GM3更具特异性,因两者在正常黑素细胞中的比值GM3:GD3为18:1,在黑素瘤中GM3:GD3为1:15。

目前针对神经节 苷酯的单抗有数10株,各株的抗原结合特性有一定差异,较早的一株名为R24的抗原为GD3,除与黑素瘤、星形细胞瘤反应外,与其它一些恶性肿瘤及少数正常组织亦有反应。国内引进的一株名为Mel3的杂交瘤所针对的抗原为GD2、GT3、GD3、GQ16,10例黑素瘤组织细胞100%强阳性或中度阳性,4/7例色素痣的部分细胞弱阳性或中度阳性,4/14例表皮黑素细胞呈极弱反应,胎肝以外的其它胚胎组织阴性。田芳等用该单抗所染结果与前述相类似。

P97抗原是一膜结合的转铁蛋白样分子,黑素瘤细胞膜上含量很高。现已克隆出P97分子cDNA并制备成分子疫苗,但应用前景尚不明。对P97的研究主要是应用放免法,很少应用免疫组化方法。

S-100蛋白、波形纤维蛋白虽不象一些黑素瘤相关抗原那样具有高特异性,但其应用范围广,易获得,所以此二种蛋白的抗体在黑素瘤鉴别诊断中应用最普遍。我们对68例病理确诊或疑诊的黑素瘤组织进行染色,结合抗角蛋白抗体标染,HE切片观察等,否定了11例的诊断,余57例S-100蛋白及波形纤维蛋白均阳性。根据此观察,笔者认为:在HE切片观察基础上,排除一些神经性肿瘤、组织细胞增生症X、色素痣,S-100蛋白及波形纤维蛋白均阳性,能肯定恶性黑素瘤诊断,两抗体均阴性能否定诊断。

NSE在黑素瘤中的表达率较低,染色弱,在黑素瘤鉴别诊断中实用意义不大。

 

缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柣鎴eГ閸婂潡鏌ㄩ弴妤€浜惧銈庡亜缁绘濡甸幇鏉跨闁规儳鍘栭悽濠氭⒒娓氣偓濞佳囁囬锕€鐤炬繛鎴欏灪閸ゅ鎲搁悧鍫濈瑲闁绘挻鐟х槐鎾存媴闂堟稓浠奸梺鍝勵儑閸犳牠寮诲☉娆愬劅闁跨喓濮村浼存⒑閸濆嫮鐏遍柛鐘虫尵濡叉劙骞掑Δ鈧~鍛存煟濡櫣锛嶅ù婊勫姍濮婄粯鎷呴崨闈涚秺椤㈡牠宕卞☉妯碱唶闂佸綊妫跨欢銈囩礊閺嶃劎绡€闂傚牊渚楅崕鎰版煙椤栨粌浠﹂柕鍥у楠炲洭鍩℃担鎻掍壕婵°倐鍋撻柍缁樻閺佹捇鏁撻敓锟�

濠电姷鏁告慨鐑姐€傞挊澹╋綁宕ㄩ弶鎴狅紱闂佽宕樺▔娑氭閵堝憘鏃堟晲閸涱厽娈查梺绋款儏椤戝寮婚敐鍛傜喎鈻庨幆褎顔勯柡澶嗘櫆缁诲牆顫忛搹瑙勫磯闁靛ǹ鍎查悵銏ゆ⒑閻熸澘娈╅柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柤鍝ユ暩娴犳碍淇婇悙顏勨偓鏍垂閻㈢ǹ绠犻柟鐗堟緲缁犳煡鏌曡箛瀣偓鏇犵不閿濆鐓ラ柡鍥殔娴滈箖姊洪挊澶婃殶闁哥姵鐗犲濠氬Ω閳哄倸浜為梺绋挎湰缁嬫垿顢旈敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柤鍝ユ暩娴犳氨绱撻崒娆掑厡缂侇噮鍨堕妴鍐川鐎涙ê浠奸梺缁樺灱婵倝宕戦妸褏纾奸悗锝庡亜椤曟粓鏌f惔顔煎⒋婵﹨娅i幑鍕Ω閵夛妇褰氶梻浣烘嚀閸ゆ牠骞忛敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偞鐗犻、鏇㈡晝閳ь剛澹曢悷鎵虫斀闁绘ê鐤囨竟妯肩磼閻橀潧鈻堥柡宀€鍠栭獮鍡氼槾闁圭晫濮电换娑㈠川椤栨埃鏋呴梺鍝勮閸旀垿骞冮妶澶婄<婵炴垶锕╂导锟�濠电姷鏁告慨鐑藉极閹间礁纾婚柣鎰惈閸ㄥ倿鎮规潪鎵Э婵炴垯鍨圭粻锝夋煟閹邦厼顥嬬紒鐘冲哺濮婃椽骞栭悙鎻掑Ф闂佸憡鎸诲畝绋跨暦閺囥垹绠荤紓浣贯缚閸欏棝姊虹紒妯荤闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷濠电姷鏁告慨鐑藉极閹间礁纾婚柣鎰惈閸ㄥ倿鏌涢锝嗙缂佺姴缍婇弻宥夊传閸曨剙娅i梺娲诲幗椤ㄥ﹪寮诲鍫闂佸憡鎸婚惄顖炲春閳ь剚銇勯幒鎴濇灓婵炲吋鍔欓弻鐔哄枈閸楃偘鍠婂Δ鐘靛仜缁绘﹢寮幘缁樻櫢闁跨噦鎷�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕闁芥ɑ绻堥弻鐔风暋閻楀牊鎷遍梺鐟板暱閻倸顫忕紒妯诲闁告稑锕ラ崕鎾绘⒑濞茶骞栨い锔炬暬閻涱喛绠涘☉娆愭闂佽法鍣﹂幏锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹瀹勬噴褰掑炊椤掆偓绾惧鏌熼幍顔碱暭闁稿鍊濋弻锟犲礃閵娧冾暫闂佹悶鍔岄崐鍧楀蓟閳╁啫绶為悗锝呭缁屽潡鎮峰⿰鍛暭閻㈩垱顨婂鏌ュ箹娴e湱鍙嗛梺缁樻礀閸婂湱鈧熬鎷�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍊块柨鏇炲€归崕鎴犳喐閻楀牆绗掔痪鎯х秺閺屸€愁吋鎼粹€崇闂侀€炲苯澧柛鐔告綑閻g兘宕¢悙鈺傜€婚梺褰掑亰閸撴瑩鐛幋锔解拻濞达綀濮ょ涵鍫曟煕閿濆繒鐣垫鐐茬箻閺佹捇鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹瀹勬噴褰掑炊椤掆偓绾惧鏌熼幍顔碱暭闁稿鍊濋弻锟犲礃閵娧冾暫闂佹悶鍔岄崐鍨潖濞差亶鏁嗛柍褜鍓涚划鏃堝箻椤旇棄鐝旈梺缁樻煥閸氬鎮¢妷鈺傜厽闁哄洨鍋涢埀顒€婀遍埀顒佺啲閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偞鐗犻、鏇㈡晝閳ь剛澹曡ぐ鎺撶厱婵犻潧瀚崝銈囩磼閳ь剚绻濋崒妤佹杸闂佺粯蓱瑜板啴鍩€椤掑倹鏆€殿喗鎮傚浠嬵敇閻斿搫寮抽梻浣虹帛濞叉牠宕愰崷顓涘亾濮樼偓瀚�闂傚倸鍊搁崐宄懊归崶褏鏆﹂柣銏⑶圭粣妤呮煙閹殿喖顣奸柛瀣剁節閺屾洘寰勯崼婵嗗濠电偞鍨惰彜闁衡偓娴犲鍊甸柨婵嗗暙婵$兘鏌涚€n偅宕岀€规洘甯¢幃娆戔偓娑櫳戦鐔兼⒒娴h姤纭堕柛锝忕畵楠炲繘鏁撻敓锟�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾瑰瀣捣閻棗銆掑锝呬壕闂佽鍨伴ˇ鐢稿箠閺嶎厼鐓涢柛灞捐壘缁ㄣ儲绻濋悽闈涒枅婵炰匠鍥ㄥ亱闊洦娲滈惌鍡椻攽閻樺弶澶勯柣鎾卞劦閺岋綁寮撮悙娴嬪亾閸︻厸鍋撳鐐闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偛顦甸弫鎾绘偐閼碱剦妲烽梻浣告惈濞层垽宕归崷顓犱笉闁绘ḿ绮悡娆撴煛婢跺﹦浠㈢紒銊ㄥ吹缁辨挸顓奸崱娆忊拰闂佸搫琚崝鎴﹀箖閵堝纾兼繛鎴烇供娴硷拷濠电姷鏁告慨鐑藉极閸涘﹥鍙忓ù鍏兼綑閸ㄥ倸鈹戦崒婧撳綊寮伴妷鈺傜厸鐎广儱楠搁獮妤呮煕鐎n亶鍎愮紒缁樼箖缁绘繈宕掑⿰鍐f嫪缂傚倸鍊哥粔鐢告偋閻樿钃熼柕濞炬櫆閸嬪棝鏌涚仦鍓р槈妞ゅ骏鎷�濠电姷鏁告慨鐑藉极閸涘﹥鍙忛柣鎴濐潟閳ь剙鍊圭粋鎺斺偓锝庝簽閸旓箑顪冮妶鍡楃瑨闁哥噥鍨堕幃鐢割敂閸″繐浜鹃柣鐔哄閸熺偟绱掔拠鎻掓殻濠碉紕鏁诲畷鐔碱敍閿濆棙娅囨俊鐐€栫敮濠勭矆娓氣偓椤㈡棃鏁撻敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍊块柨鏇炲€归崕鎴犳喐閻楀牆绗掗柛銊ュ€搁湁闁绘ǹ灏欓幊浣割熆閼搁潧濮囩紒鐘侯嚙闇夐柛蹇氬亹閹冲懐绱掔€n亞绠绘慨濠呮閹瑰嫰濡搁妷锔惧綒闂備胶鎳撻崵鏍箯閿燂拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偛顦甸弫鎾绘偐閸愯弓鐢婚梺鍝勵槸閻楀啴寮插┑鍫㈢焼濠电姴娲﹂悡鍐喐濠婂牆绀堥柣鏃傚帶閽冪喐绻涢幋鐑囦緵婵炵鍔戦弻娑㈩敃閵堝懏鐎诲銈呴獜閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偞顨呴オ浼村礋椤掆偓瀵潡姊洪崷顓℃闁哥喓鍠栧畷鍫曨敆娴e搫濮搁柣搴$畭閸庤京鎹㈤幒鏃傜煓闊洦绋掗埛鎴︽偣閹帒濡兼繛鍛姍閺岀喖宕欓妶鍡楊伓 濠电姷鏁告慨鐢割敊閺嶎厼绐楁俊銈傚亾闁伙絿鍏樺畷绋课旈埀顒勭嵁閵忊€茬箚闁靛牆鍊告禍楣冩⒑鐠団€崇仯闁稿鍊曢~蹇涙惞閸︻厾鐓撻柟鐓庣摠閹告悂骞冨澶嬧拺闁荤喐婢樺▓鈺呮煙閸戙倖瀚�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍊块柨鏇楀亾妞ゎ亜鍟撮獮鎰償閿濆孩閿ら梻浣瑰缁诲倿藝椤栨粌顥氬┑鐘崇閻撴瑩鏌℃径濠勪虎缂併劏宕电槐鎾愁吋閸℃瑥鈷岄梺鍝勮閸旀垿骞冮妶澶婄<婵炴垶锕╂导锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾鐎规洏鍎抽埀顒婄秵娴滃爼鎮㈤崱妯圭箚妞ゆ牗绮岀敮鑸点亜閵夛妇顣查柕鍥у楠炴瑩宕橀埡鍐崸缂傚倸鍊哥粔鐢告偋閻樿钃熼柕濞炬櫆閸嬪棝鏌涚仦鍓р槈妞ゅ骏鎷�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柤鍝ユ暩娴犳碍绻濆▓鍨灍闁挎洦鍋嗙划濠氬箣閿曗偓閻撴繈鏌¢崘銊у闁告娅曢妵鍕敃椤愩垺鐏撶紓浣割儏缁绘ê顫忛搹瑙勫磯闁靛ǹ鍎查悵銏ゆ⒑閻熸澘娈╅柟鍑ゆ嫹闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹瀹勬噴褰掑炊閵娧呭骄闂佸壊鍋掑鈧柣鎺戯攻缁绘盯宕卞Ο鍝勵潔闂佸憡鐟ョ换鎰亙闂佹寧绻傞幊搴ㄥ汲濞嗘垹妫柟顖嗗嫬浠撮梺鍝勮閸旀垿骞冮妶澶婄<婵炴垶锕╂导锟�婵犵數濮烽弫鍛婃叏閻戣棄鏋侀柟闂寸绾剧粯绻涢幋鏃€鍤嶉柛銉墻閺佸秹鏌i幇顓熺稇婵炲牞绲介—鍐Χ閸℃瑥顫х紓渚囧枛濞撮鍒掗崼銉ョ妞ゆ牗绋撻崣鍡涙⒑缂佹ɑ绀€闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柛顐f礀閸屻劎鎲稿澶樻晪闁挎繂顦粈鍫澝归敐鍥ㄥ殌閹兼潙锕铏瑰寲閺囩偛鈷夌紓浣割儐閸ㄨ绔熼弴銏犻敜婵°倓鑳堕崣鍡涙⒑缂佹ɑ绀€闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柛顐f礀閸屻劎鎲稿澶樻晪闁挎繂顦粈鍫澝归敐鍫燁仩闁绘挻鎹囧娲传閸曨厸鏋嗛梺鍛娗归崑鎰珶閺囩喓绡€婵﹩鍘鹃崣鍡涙⒑缂佹ɑ绀€闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷濠电姷鏁告慨鎾儉婢舵劕绾ч幖瀛樻尭娴滅偓淇婇妶鍕妽闁告瑥绻愰湁闁稿繐鍚嬬紞鎴犵磼閳ь剚寰勯幇顒傤啇闂佸湱鈷堥崢楣冨储濠婂懐纾界€广儱妫涙晶鐢告煛鐏炶濮傞柟顔哄€濆畷鎺戔槈濮楀棔绱�缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾圭€瑰嫰鍋婂〒濠氭煙閻戞﹩娈曢柛銈呭閺屾盯顢曢敐鍡欘槬缂佺偓鍎抽…鐑藉蓟閿濆妫橀柟绋垮閸庢捇姊洪幖鐐插缂佽鐗撳濠氬Ω閳哄倸浜為梺绋挎湰缁嬫垿顢旈敓锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹妞嬪海鐭嗗〒姘e亾妤犵偛顦甸弫宥夊礋椤撶姷鍘梻浣筋潐瀹曟﹢顢氳瀹曟帡濡歌閸犳劙鏌¢崘銊уⅱ鐎规挷绶氶弻娑㈠焺閸愵亖濮囬梺鍝勬噺閹倿寮婚妸鈺傚亞闁稿本绋戦锟�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍊块柨鏇楀亾妞ゎ亜鍟村畷绋课旀担闀愮暗闂備礁澹婇崑渚€宕曟潏鈺冪幓婵°倓鑳剁粻楣冩煙鐎涙ḿ鎳冮柣蹇婃櫇閻ヮ亪骞嗚閻撳ジ鏌$仦璇插闁诡喓鍊濆畷鎺戔槈濮楀棔绱�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹瀹勬噴褰掑炊閵娧呭骄闂佸壊鍋掑鈧柣鎺戯攻閵囧嫯绠涢幘鎰佷槐闂佸搫顑嗛悧鐘诲蓟閿熺姴鐐婇柍杞拌閸嬫捇鏁愭径瀣珳婵犮垼娉涢鍡椻枍閵忋倖鈷戦悹鎭掑妼濞呮劙鏌熼崙銈嗗缂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间礁纾归柟闂寸绾惧湱绱掔€n偓绱╂繛宸簻鍥撮梺绯曟閺呮粓顢欓弮鍫熲拺鐟滅増甯楅敍鐔虹磼鐠佸湱绡€鐎殿噮鍋呯换婵嬪炊閵娧冨汲闂備胶绮ú鏍磹閸︻厸鍋撳鐐濠电姷鏁告慨鐑藉极閹间礁纾块柟瀵稿Т缁躲倝鏌﹀Ο渚&婵炲樊浜濋弲婊堟煟閹伴潧澧幖鏉戯躬濮婅櫣绮欓幐搴㈡嫳缂備礁顑嗛幑鍥Υ閸涘瓨鍊婚柤鎭掑劤閸欏棝姊虹紒妯荤闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷闂傚倸鍊峰ù鍥敋瑜嶉湁闁绘垼妫勭壕濠氭煥濠靛棭妲哥痪鎹愵潐缁绘盯骞嬮悙鍐╁哺瀵悂寮介妸褏顔曢梺鐟扮摠閻熴儵鎮炲ú顏呯厸濞达絽澹婇崕鏃堟煛鐏炶濮傞柟顔哄€濆畷鎺戔槈濮楀棔绱�闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閹间降鍋戦柟缁㈠枛绾惧鏌涢弴銊モ偓瀣洪鍕幯冾熆鐠虹尨鍔熼柡灞界墦濮婅櫣鎲撮崟顐㈠Ц濠碘槅鍋勭€氼喚鍒掗崼銉ラ唶闁靛濡囬崣鍡涙⒑缂佹ɑ绀€闁稿﹤婀遍埀顒佺啲閹凤拷
闂傚倸鍊搁崐椋庣矆娓氣偓楠炴牠顢曚綅閸ヮ剦鏁冮柨鏇楀亾闁汇倗鍋撶换婵囩節閸屾粌顣洪梺钘夊暟閸犳牠寮婚弴鐔虹闁割煈鍠栨竟鍕攽閻愬弶鈻曞ù婊勭矒瀹曟﹢鍩€椤掑嫭鈷戦梻鍫熺▓鎼撮绱掗懠璺轰汗闁奸缚椴哥换婵嗩潩椤撴稒瀚奸梻浣告啞閹告槒銇愰崘鈺冾洸婵犻潧娲ㄧ粻楣冩煕濞嗗浚妲哄褏鏁搁埀顒冾潐濞叉ḿ鎹㈤崼銉ユ瀬闁瑰墽绮弲鎼佹煥閻曞倹瀚�